準(zhǔn)備工作：在開始使用 UElandy PCR 清潔試劑盒前，要先確認實驗設(shè)備和試劑狀態(tài)。對于負壓法，需正確連接負壓裝置，并將 96 孔 DNA 制備板置于其上；若采用離心法，則準(zhǔn)備好離心機和配套的 96 孔 1.6 ml 深孔板。同時，按試劑瓶上指定體積，往 Buffer W2 concentrate 中加入無水乙醇（可用無水乙醇或 95% 乙醇），并充分混合均勻，以此獲得用于洗滌的 Buffer W2 。

結(jié)合反應(yīng)：在 PCR、酶切、酶標(biāo)或測序反應(yīng)液中，加入 3 倍體積的 Buffer PCR - A。如果 Buffer PCR - A 的用量不足 100μl，需將其加至 100μl。隨后，充分混合均勻，確保反應(yīng)液與 Buffer PCR - A 融合。接著，將混合液轉(zhuǎn)移到 96 孔 DNA 制備板中。對于負壓法，開啟負壓裝置，并調(diào)節(jié)負壓至 - 25 - 30 英寸汞柱，緩慢吸掉板中的溶液，促使 DNA 牢固結(jié)合在硅膠膜上；離心法則是將 96 孔 DNA 制備板置于 96 孔 1.6 ml 深孔板中，以 1000 x g 離心 1 min，棄去濾液，實現(xiàn) DNA 與硅膠膜的結(jié)合 。

洗滌步驟：向 96 孔 DNA 制備板中加入 0.3 ml Buffer W2。負壓法下，再次開啟負壓吸盡管中溶液；離心法是以 1000 x g 離心 1 min，棄去濾液。此洗滌步驟需重復(fù)兩次，從而清除結(jié)合在硅膠膜上的鹽分及其他小分子雜質(zhì) 。

干燥處理：負壓法需保持負壓狀態(tài)，將 96 孔 DNA 制備板抽吸 10 min，盡量去除殘留液體，之后將導(dǎo)流管朝下，在長纖維性紙巾上用力拍擊 6 次，進一步排除可能殘留的液體；離心法是將 96 孔 DNA 制備板再次置于 96 孔 1.6 ml 深孔板中，以 3000 x g 離心 10 min，盡可能去除殘留液體，為后續(xù)洗脫做準(zhǔn)備 。

洗脫 DNA：將 96 孔 DNA 制備板置于 96 孔 V 型底板上，在膜正中央加入 25 - 30μl 水或 Eluent，室溫靜置 1 min，使洗脫液充分浸潤硅膠膜。隨后，以 3000 x g 離心 5 min，將純化后的 DNA 洗脫到 V 型底板中。此時，便可獲得高純度的 PCR 產(chǎn)物，用于后續(xù)的限制性酶切、連接反應(yīng)、分子雜交以及自動化熒光測序等實驗 。

注意事項：使用過程中，務(wù)必嚴格按照試劑盒說明書進行試劑添加與操作條件控制。比如，Buffer W2 concentrate 使用前加入無水乙醇的操作必須準(zhǔn)確無誤；進行洗脫時，若將洗脫液或水加熱至 65℃，能夠有效提高洗脫效率；考慮到 DNA 分子呈酸性，建議將純化后的 DNA 保存在 2.5 mM Tris - HCl，pH 8.5 的洗脫液中，以維持 DNA 的穩(wěn)定性 。